13. [生物——选修1：生物技术实践]（15分）
我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。
某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：
①分别配制营养琼脂培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20）和伊红美蓝培养基（成分：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O），灭菌。
②取水样。   
③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取ImL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。
④用滤膜法测定乙项指标，装置和操作如下图。

回答下列问题：
(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min，目的是                    。
(2)步骤③测定的指标甲是                      。水样涂布前无需稀释，理由是
                                             。
(3)步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现      色菌落。配制伊红美蓝培养基时，先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基，在100kPa、121℃条件下灭菌后，冷却至60℃左右，再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液，后者灭菌条件不同的原因是                                                       。
(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据
            （填“可信”或“不可信”），理由是                                          。
[解析]
（1）实验过程要进行严格的灭菌，水龙头用火焰灼烧3min，目的就是灭菌。
（2）实验过程首先要测定细菌的总数，再测定大肠杆菌数，因为自来水中细菌数量很少，所以水样涂布前无需稀释。
（3）指标乙是大肠杆菌，大肠杆菌在伊红美蓝培养基上会呈现紫黑色并带有金属光泽。后者灭菌条件
比前者所需要的温度及压强都低，是因为后者操作过程加入了乳糖，溶液中的乳糖高温下会破坏。
（4）若将水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，则原有水样中的细菌就会在培养液中
繁殖，稀释涂布平板计数得到的数量不能真实反映水样中原有的数量，因此这样操作获得的数据是不可信的。

[参考答案] 
（1）灭菌   （2）细菌总数  自来水中细菌数量减少  
（3）黑   溶液中的乳糖在高温下破坏  
（4）不可信   细菌会在营养培养液中大量繁殖，对数量不能真实反映水样中原有的数量