11．蚯蚓常以土壤中的秸秆和微生物为食，研究表明蚯蚓能通过分泌体液或者消化液影响微生物的生命活动。为探究蚯蚓肠液和体表分泌液对纤维素分解菌存活情况的影响，研究小组进行如下实验。回答下列问题：
(1)从土壤中筛选纤维素分解菌可以用________法。根据透明圈的大小可以鉴别纤维素分解菌分解纤维素的能力，其原理是________________________________________________________________________。
(2)补充以下实验步骤：
①提取蚯蚓的肠液和体表分泌液，在－18 ℃环境中保存；
②分别取等体积肠液和体表分泌液与1 μL稀释培养的______________________混合；
③对照组应设置为______________________________________________________________________；
④在18～20 ℃培养2 h后，采用________法在平板接种，将各组平板置于相同且适宜的条件下培养一段时间；
⑤________________________________________________________________________。
【答案】(1)刚果红染色　刚果红能与培养基中纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，培养基就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈大则分解能力大，反之分解能力小  (2)②纤维素分解菌  ③取等体积无菌水替代肠液和体表分泌液，其他与实验组相同  ④稀释涂布平板　⑤观察并记录各组的菌落数，分析实验结果
【解析】　(1)微生物培养过程中需要使用不同的鉴别方法。纤维素分解菌可使用刚果红染色法进行筛选。其原理是刚果红能与培养基中纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，培养基就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈大则分解能力大，透明圈小则分解能力小。以此作为鉴别纤维素分解菌分解纤维素的能力大小的依据。(2)探究蚯蚓肠液和体表分泌液对纤维素分解菌存活情况的影响，其中自变量是肠液和体表分泌液，因变量是纤维素分解菌的存活情况。实验步骤如下：向等体积的肠液、体表分泌液和无菌水中分别加入1 μL稀释培养的纤维素分解菌混合培养；在18～20 ℃培养2 h后，采用稀释涂布平板法在平板接种，便于后期对菌落计数；将各组平板置于相同且适宜的条件下培养，观察并记录各组的菌落数，根据结果分析蚯蚓肠液和体表分泌液对纤维素分解菌存活情况的影响。