由于“人—人杂交瘤技术”存在杂交瘤细胞体外传代不稳定、抗体亲合力低等缺陷,目前单克隆抗体大多是鼠源性的,应用于人体治疗时存在诸多问题。

5、[2019·四川省诊考]由于“人—人杂交瘤技术”存在杂交瘤细胞体外传代不稳定、抗体亲合力低等缺陷,目前单克隆抗体大多是鼠源性的,应用于人体治疗时存在诸多问题。科学家通过基因工程技术,可以最大程度降低抗体的鼠源性,降低甚至消除人体对抗体的排斥反应。回答下列问题:
(1)从经过抗原免疫个体的________细胞中提取mRNA,通过________方法获取目的基因。将目的基因在体外大量扩增可以采用________技术。
(2)为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接,在切割目的基因和质粒时,应该注意________________________________________。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程,可以采用________处理受体菌。
(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法是________________________。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比,最突出的优点是________________________________________________________________________。
解析:(1)获取制备单克隆抗体的目的基因,可以从经过抗原免疫个体的浆细胞中提取mRNA,然后通过逆转录的方法获得DNA,将目的基因在体外大量扩增可以采用PCR技术。(2)为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接,在切割目的基因和质粒时,应该注意使用不同限制酶切割目的基因与质粒,以形成不同的黏性末端。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程,可以采用CaCl2处理受体菌。(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法是抗原-抗体杂交。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比,最突出的优点是不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应。
答案:(1)浆 逆转录 PCR (2)使用不同限制酶切割目的基因与质粒 CaCl2 (3)抗原-抗体杂交 不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应
 
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