实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器:5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制备酶溶液。
步骤二:将酶液经一定方法处理,取出后冷却。
步骤三:取6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按下表要求加入试剂,再观察各试管内的颜色变化。(注:+表示溶液变蓝色,-表示溶液不变蓝色)
试管编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
①加入5%的可溶性淀粉溶液(mL) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
②恒温水浴5 min |
0 ℃ |
20 ℃ |
40 ℃ |
60 ℃ |
80 ℃ |
100 ℃ |
③加入处理后的酶液 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
④溶液混合,振荡后恒温水浴5 min |
0 ℃ |
20 ℃ |
40 ℃ |
60 ℃ |
80 ℃ |
100 ℃ |
⑤加入碘液,振荡后观察颜色变化 |
+++ |
++ |
+ |
- |
++ |
+++ |
请回答下列问题:
(1)选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是______________________________。
(2)步骤二的处理方法是________________________________________________________________________。
(3)根据试管________中观察的实验结果,可推断α淀粉酶的最适温度为________左右。
(4)该实验中能否选用斐林试剂检测实验结果?______。理由是________________________________________________________________________。
(5)若要进一步研究小麦种子中β淀粉酶的最适温度,则需获得β淀粉酶保持活性而α淀粉酶失活的酶溶液。则步骤二处理的方法是________________________。
(6)步骤三的表格中,若②和③顺序颠倒,将________(填“影响”或“不影响”)实验结果。
解析:(1)小麦种子中主要的储能物质是淀粉,小麦种子萌发时会形成大量的淀粉酶,因此可选用萌发的小麦种子提取淀粉酶。(2)α淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6、0 ℃下可迅速失活,而β淀粉酶耐酸、不耐热,在70 ℃条件下15 min后失活。提取小麦种子中α淀粉酶,步骤二中可进行70 ℃水浴15 min,即可使β淀粉酶灭活。(3)加入碘液后,试管4中不变蓝色,说明淀粉已被完全水解,该试管对应的温度为60 ℃,为α淀粉酶的最适温度。(4)使用斐林试剂检测实验结果时需水浴加热,会改变该实验中的温度,影响实验最终结果,因此不能用斐林试剂检测实验结果。(5)获得β淀粉酶保持活性而α淀粉酶失活的酶溶液。步骤二中将酶液置于pH为3.6、温度为0 ℃下的环境中,即可使α淀粉酶失活。(6)步骤三的表格中,若②和③顺序颠倒,由于酶具有高效性,淀粉与酶液混合后会立即发生反应,影响实验结果。
答案:(1)小麦种子萌发时形成大量的淀粉酶 (2)70 ℃水浴中15 min (3)4 60 ℃ (4)不能 斐林试剂检测时需水浴加热,会改变该实验中的温度,影响实验最终结果 (5)置于pH为3.6、温度为0 ℃下的环境中 (6)影响