12.荔枝、龙眼果实风味佳,而成熟荔枝极不耐保存。科研人员利用转基因技术和植物体细胞杂交技术对荔枝、龙眼育种开展研究。

[生物一选 修3:现代生物科技专题]
12.荔枝、龙眼果实风味佳,而成熟荔枝极不耐保存。科研人员利用转基因技术和植物体细胞杂交技术对荔枝、龙眼育种开展研究。请回答下列问题:
(1)荔枝愈伤组织分化的胚状体在培养时存在严重玻璃化、畸形胚多的现象,科研人员通常采用___________(填方法)导入外源hpt基因和gus基因,来获得稳定再生胚性愈伤组织(TPEC)。培养荔枝愈伤组织的培养基中除需要添加无机营养成分、有机背养成分外,还需要添加______________(答出两点即可)等。
(2)用__________技术可以检测TPEC细胞稳定表达的gus蛋白。选取部分细胞在一定溶液中用________(填酶的名称)处理后可以获得原生质体。
(3)用黄绿色的异硫氰酸荧光素标记荔枝TPEC细胞的原生质体,用红色的异硫氰酸碱性蕊香红标记龙眼细胞的原生质体。将两种原生质体按1:1的比例在电融仪中诱导融合,原生质体融合的原理是________________________________________。
(4)杂种细胞的筛选工作至关重要,荧光显微镜下筛选杂种细胞的方法是_______________。
答案】    (1). 农杆菌转化法    (2). 植物激素、琼脂    (3). 抗原一抗体杂交    (4). 纤维素酶和果胶酶    (5). 细胞膜具有一定的流动性    (6). 挑选能够产生黄绿色和红色两种荧光的原生质体,即杂种细胞

【详解】(1)将外源基因导人荔枝愈伤组织通常采用农杆菌转化法。培养荔枝愈伤组织的培养基中除了需要添加无机营养成分、有机营养成分外,还需要添加植物激素和琼脂等。
(2)gus蛋白的检测方法为抗原一抗体杂交技术。获得原生质体的方法是用纤维素酶和果胶酶处理荔枝的愈伤组织。
(3)原生质体融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。
(4)由于荔枝原生质体用黄绿色的异硫瓿酸荧光素标记,龙眼原生质体用红色的异硫瓿酸碱性蕊香红标记,荧光显微镜下筛选杂种细胞的方法是挑选能够产生黄绿色和红色两种荧光的原生质体,即杂种细胞。

 
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