35.(5分)利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。

34.(7分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
 
据图回答下列问题:
(1)过程①所需的酶是__________。
(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是__________________。原生质体经过________再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和________植株的根尖制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有________。
 
(6)对杂种植株进行________接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
34.(7分,每空1分)(1)纤维素酶和果胶酶 (2)叶绿体 (3)保持原生质体完整性  细胞壁 
(4)双亲(或:花椰菜和黑芥) (5)1、2、4 (6)黑腐病菌(注:只答病菌或抗病接种不得分)



35.(5分)利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程,请回答下列问题:
 
(1)对1号猪使用激素处理,使其超数排卵,收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号猪的组织块,用__________处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO2培养箱中培养,其中CO2的作用是____________________________。
(3)将重组胚胎移植到3号猪的子宫中,产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有__________(填序号)。
①DNA测序    ②染色体倍性分析    ③体细胞结构分析   ④抗原—抗体杂交

35.(5分,每空1分)(1)减数第二次分裂中期  (2)胰蛋白酶(或:胶原蛋白酶)    维持培养液的pH  (3)2  (4)①④

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