33．（9分）水稻穗粒数可影响水稻产量。农杆菌Ti质粒上的T-DNA序列，可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物的核基因组中，导致被插入的基因功能丧失。研究者用此方法构建水稻突变体库，并从中筛选到穗粒数异常突变体进行了相关研究。
（1）研究者分别用EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶处理突变体的总DNA，用Hind Ⅲ处理野生型的总DNA，处理后进行电泳，使长短不同的DNA片段______。电泳后的DNA与DNA分子探针（含放射性同位素标记的T-DNA片段）进行杂交，得到下图所示放射性检测结果。
①由于杂交结果中____________________________________________，表明T-DNA成功插入到水稻染色体基因组中。（注：T-DNA上没有EcoRⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶的酶切位点）
②不同酶切结果，杂交带的位置不同，这是由于_____________________________________。
③由实验结果断定突变体为T-DNA单个位点插入，依据是____________________________________。
（2）研究者用某种限制酶处理突变体的DNA（如下图所示），用__________将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，再利用图中的引物__________组合进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。
（3）研究发现，该突变体产量明显低于野生型，据此推测B基因可能_______（填“促进”或“抑制”）水稻穗粒的形成。育种工作者希望利用B基因，对近缘高品质但穗粒数少的低产水稻品系2进行育种研究，以期提高其产量，下列思路最可行的一项是______。
a．对水稻品系2进行60Co照射，选取性状优良植株
b．培育可以稳定遗传的转入B基因的水稻品系2植株
c．将此突变体与水稻品系2杂交，筛选具有优良性状的植株
33．（9分，除标明外，每空1分）（1）分离 ①突变体在不同限制酶处理时均出现杂交带，野生型无杂交带，Ti质粒有杂交带（2分，需同时说明各突变体和野生型是否有杂交带才能得2分，缺一项0分，Ti质粒可不分析） ②不同限制酶处理后含T-DNA的片段长度不同 ③用三种不同限制酶处理都只得到一条杂交带，而野生型无杂交带（本空可不分析野生型） （2）DNA连接酶 ①、④ （3）促进 b
（1）研究者分别用EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶处理突变体的总DNA，用Hind Ⅲ处理野生型的总DNA，处理后进行电泳，使长短不同的DNA片段______。电泳后的DNA与DNA分子探针（含放射性同位素标记的T-DNA片段）进行杂交，得到下图所示放射性检测结果。
②不同酶切结果，杂交带的位置不同，这是由于_____________________________________。
③由实验结果断定突变体为T-DNA单个位点插入，依据是____________________________________。
（2）研究者用某种限制酶处理突变体的DNA（如下图所示），用__________将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，再利用图中的引物__________组合进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。
a．对水稻品系2进行60Co照射，选取性状优良植株
b．培育可以稳定遗传的转入B基因的水稻品系2植株
c．将此突变体与水稻品系2杂交，筛选具有优良性状的植株
33．（9分，除标明外，每空1分）（1）分离 ①突变体在不同限制酶处理时均出现杂交带，野生型无杂交带，Ti质粒有杂交带（2分，需同时说明各突变体和野生型是否有杂交带才能得2分，缺一项0分，Ti质粒可不分析） ②不同限制酶处理后含T-DNA的片段长度不同 ③用三种不同限制酶处理都只得到一条杂交带，而野生型无杂交带（本空可不分析野生型） （2）DNA连接酶 ①、④ （3）促进 b
